Восприимчивать клеток рака молочной железы к химиопрофилактике D,L- сульфорафаном (SFN), синтетическому рацемическому аналогу содержащегося в брокколи L- сульфорафана , частично объясняется индукцией апоптоза, однако механизм клеточной гибели до конца не ясен. Настоящее исследование демонстрирует важную роль адаптерного белка p66Shc в сульфорафан-индуцированном апоптозе. Иммортализованные («бессмертные») эмбриональные мышиные фибробласты, полученные от нокаутных мышей с "выбитым" p66shc геном были значительно более устойчивы к сульфорафан-индуцированному апоптозу, коллапсу мембранного потенциала митохондрий и воздействию активных форм кислорода (АФК) по сравнению с эмбриональными фибробластами, полученными от диких мышей. Примечательно, что спонтанно иммортализированная и не являющаяся онкогенной линия эпителиальных клеток молочной железы человека (MCF-10A) была устойчива к сульфорафан-индуцированной продукции АФК и апоптозу. Стабильная сверхэкспрессия марганец-зависимой супероксиддисмутазы в MCF-7 и MDA-MB-231 клетках рака молочной железы человека обеспечивает практически полную защиту от сульфорафан-индуцированного апоптоза и коллапса мембранного потенциала митохондрий. Лечение сульфорафаном привело к увеличению фосфорилирования S36 и митохондриальной транслокации p66shc в MDA-MB-231 и MCF-7 линиях клеток. Кроме того наблюдалось значительное ослабление сульфорафан-индуцированного апоптоза РНК-интерференцией p66shcin обоих клеточных линий. При воздействии сульфорафана на MDA-MB-231 и MCF-7 клеточные линии, в них также было отмечено заметное снижение уровня пептидил-пролил изомеразы (Pin1), которая участвует в митохондриальной транслокации p66shc. Однако стабильная сверхэкспрессия Pin1 не смогла изменить проапоптозный ответ на действие сульфорафана по крайней мере в MCF-7 клетках. Наконец было выявлено, что сульфорафан -индуцированное S36 фосфорилирование p66Shc опосредовано действием протеинкиназы С. Кроме того фармакологическое ингибирование протеинкиназы С значительно тормозит апоптоз клеток в результате воздействия сульфорафана. В заключение хочется сказать, что настоящее исследование открывает новый взгляд на механизм сульфорафан-индуцированного апоптоза с участием протеинкиназы С-опосредованного S36 фосфорилирования p66shc .
Авторы исследования: Sakao, Kozue; Singh, Shivendra V.